Biologie cellulaire : La mitochondrie (Bi502N)

Endosymbiose (~2 milliards d'années). La plupart des gènes mitochondriaux ont ensuite migré vers le noyau.

Les molécules de moins de 5 kDa (la membrane externe est perméable).

Navette d'électrons entre les complexes III et IV, dans l'espace intermembranaire.

La membrane interne : chaîne respiratoire, ATP synthase, échangeur ADP/ATP, cardiolipine, TIM23/TIM22/OXA.

Cycle de Krebs, β-oxydation, ADNmt, mtHsp70.

Externe : TOM, SAM. Interne : TIM23, TIM22, OXA.

3 NADH + 1 GTP + 1 FADH₂ + 2 CO₂

Reçoit les e⁻ du NADH ; pompe des H⁺.

Reçoit les e⁻ du FADH₂ (court-circuite I) ; ne pompe PAS de H⁺.

Ubiquinone → cytochrome c ; pompe des H⁺.

Cytochrome c → O₂ → H₂O (accepteur final) ; pompe des H⁺.

Utilise le retour des H⁺ pour synthétiser l'ATP. Il consomme le gradient (il ne le crée pas).

I, III, IV. Le complexe II ne pompe pas.

Il entre au complexe II qui ne pompe pas de H⁺ : il court-circuite le complexe I, donc moins de protons pompés par coenzyme oxydée.

Transfert d'e⁻ → pompage de H⁺ vers l'espace intermembranaire → gradient électrochimique (ΔΨm) → retour des H⁺ par F₀ → rotation → F₁ synthétise l'ATP.

F₁ = partie matricielle, catalyse la synthèse d'ATP. F₀ = partie membranaire, canal à H⁺.

Inhibée si [ATP]/[ADP] est élevé. Les dimères sont nécessaires à la forme des crêtes.

Fait entrer l'ADP dans la matrice et sortir l'ATP matriciel (membrane interne).

Ils effondrent le gradient de H⁺ → plus d'ATP, mais la chaîne continue de tourner → énergie perdue en chaleur = découplage.

Le complexe I.

Le complexe III (transfert ubiquinone → cytochrome c).

Le complexe IV (transfert final à l'O₂).

Le complexe V (ATP synthase) : bloque le retour des H⁺.

La roténone.

L'antimycine A.

Le cyanure (CN⁻) et le CO.

L'oligomycine.

Un inhibiteur (roténone, antimycine, cyanure, oligomycine) bloque un complexe précis : la chaîne s'arrête. Un découplant (CCCP, FCCP, DNP) ne bloque rien : il dissipe le gradient, la chaîne tourne à fond sans produire d'ATP.

Elles arrêtent toute respiration mitochondriale (complexes I et III) : ce qui reste = respiration non-mitochondriale résiduelle, ligne de base du test.

Régénère le NAD⁺ dans le cytosol : la glycolyse continue sans chaîne respiratoire.

Réduction séquentielle de O₂ : O₂ → O₂•⁻ (superoxyde) → H₂O₂ → HO• → H₂O.

Réduction séquentielle de O₂ : O₂ → O₂•⁻ (superoxyde) → H₂O₂ → HO• → H₂O.

Réduction séquentielle de O₂ : O₂ → O₂•⁻ (superoxyde) → H₂O₂ → HO• → H₂O.

H₂O₂ traverse les membranes ; HO• est la plus réactive.

Aux complexes I et III.

37 = 13 ARNm + 2 ARNr + 22 ARNt.

13 sur ~70. Les 1000-1500 protéines mitochondriales restantes sont codées par le noyau.

ADNmt : polyploïde (plusieurs copies/mitochondrie), pas d'histones, seulement 22 ARNt, 4 codons/64 de sens différent du code universel.

ADNmt : polyploïde (plusieurs copies/mitochondrie), pas d'histones, seulement 22 ARNt, 4 codons/64 de sens différent du code universel.

ADNmt : polyploïde (plusieurs copies/mitochondrie), pas d'histones, seulement 22 ARNt, 4 codons/64 de sens différent du code universel.

ADNmt : polyploïde (plusieurs copies/mitochondrie), pas d'histones, seulement 22 ARNt, 4 codons/64 de sens différent du code universel.

Exposition aux ERO + pas de relecture.

Humain : maternelle. Levure : biparentale.

Coexistence d'ADNmt sauvage et muté dans une cellule. Ségrégation mitotique aléatoire → proportions variables selon cellules/tissus → symptômes variables au sein d'une même famille (tissus nerveux/musculaire surtout).

Externe : mitofusines MFN1/2. Interne : OPA1.

Drp1 (recrutée en anneau au site de constriction), FIS1, MTP18.

Pas de fusion → petites mitochondries fragmentées.

Réseau hyperfusionné/tubulaire. La morphologie reflète la balance fusion/fission.

Sur microtubules : kinésine KIF5B (antérograde) / dynéine (rétrograde). Sur actine : myosine Myo19.

Mitochondrie en mauvais état : protéine mal repliée → dégradation (chaperonnes mtHsp70/Hsp60, protéases AAA+) ; mitochondrie dysfonctionnelle → ségrégation par fission ; mitochondrie endommagée → mitophagie.

Mitochondrie en mauvais état : protéine mal repliée → dégradation (chaperonnes mtHsp70/Hsp60, protéases AAA+) ; mitochondrie dysfonctionnelle → ségrégation par fission ; mitochondrie endommagée → mitophagie.

Mitochondrie en mauvais état : protéine mal repliée → dégradation (chaperonnes mtHsp70/Hsp60, protéases AAA+) ; mitochondrie dysfonctionnelle → ségrégation par fission ; mitochondrie endommagée → mitophagie.

m-AAA, i-AAA, Lon, ClpXP.

Post-traductionnel (ribosomes libres), aux sites de contact des deux membranes.

N-terminale, clivée, hélice α amphiphile.

Dépliée, maintenue par Hsp70 cytosolique (ATP).

Porte d'entrée quasi universelle (membrane externe) : reconnaît et fait traverser les précurseurs. Pas de ΔΨm.

Insère les protéines en tonneau β (membrane externe). Pas de ΔΨm.

Vers la matrice, ou arrêt dans la membrane interne. ΔΨm requis.

Insère les transporteurs de métabolites (signaux internes non clivés) dans la membrane interne. ΔΨm requis.

Insère des protéines depuis la matrice vers la membrane interne (2ᵉ signal).

Voie matrice : précurseur + signal N-ter → Hsp70 cytosolique (déplié) → TOM → TIM23 (ΔΨm) → traction par mtHsp70 → clivage du signal → repliement.

Voie matrice : précurseur + signal N-ter → Hsp70 cytosolique (déplié) → TOM → TIM23 (ΔΨm) → traction par mtHsp70 → clivage du signal → repliement.

Voie matrice : précurseur + signal N-ter → Hsp70 cytosolique (déplié) → TOM → TIM23 (ΔΨm) → traction par mtHsp70 → clivage du signal → repliement.

Matrice = TOM + TIM23 ; membrane interne = TOM + TIM22 (ou TOM + TIM23 + arrêt) ; espace intermembranaire = TOM puis libération ou oxydation par Mia40.

Matrice = TOM + TIM23 ; membrane interne = TOM + TIM22 (ou TOM + TIM23 + arrêt) ; espace intermembranaire = TOM puis libération ou oxydation par Mia40.

Matrice = TOM + TIM23 ; membrane interne = TOM + TIM22 (ou TOM + TIM23 + arrêt) ; espace intermembranaire = TOM puis libération ou oxydation par Mia40.

Une seule membrane, ni ADN ni ARN.

Acides gras > 18 C → chaînes courtes (8-10 C) → relayées vers la mitochondrie.

RH₂ + O₂ → R + H₂O₂.

Dismutation : 2 H₂O₂ → 2 H₂O + O₂. Peroxydation : détoxifie méthanol, éthanol…

Acides biliaires et plasmalogènes (myéline).

C-terminal, SKL, récepteur Pex5.

N-terminal (interne), RLX₅HL, récepteur Pex7.

Import PTS1 : protéine SKL → Pex5 (cytosol) → arrimage (Pex14) → translocation (Pex2/10/12) → matrice → recyclage de Pex5 (ATP).

Import PTS1 : protéine SKL → Pex5 (cytosol) → arrimage (Pex14) → translocation (Pex2/10/12) → matrice → recyclage de Pex5 (ATP).

Import PTS1 : protéine SKL → Pex5 (cytosol) → arrimage (Pex14) → translocation (Pex2/10/12) → matrice → recyclage de Pex5 (ATP).

Non : import post-traductionnel, sans clivage de signal.

Plus de péroxysomes.

Le mutant pex1Δ.

Biogenèse : RE → vésicules précurseurs (Pex3, Pex19) → péroxysome jeune → croissance → fission → péroxysomes fils.

Biogenèse : RE → vésicules précurseurs (Pex3, Pex19) → péroxysome jeune → croissance → fission → péroxysomes fils.

Syndrome de Zellweger (PBD).

Mito : 2 membranes, ADNmt, signal N-ter clivé, endosymbiose. Péroxysome : 1 membrane, aucun ADN/ARN, PTS1/PTS2 non clivés, origine RE + fission.

Microtubule ~25 nm (13 protofilaments) ; microfilament d'actine ~7 nm ; filament intermédiaire 8-12 nm.

L'extrémité + (tubuline β) croît vite ; l'extrémité − (tubuline α) lentement.

Instabilité dynamique : dimère GTP (forme T) s'ajoute à l'extrémité + → coiffe GTP stable → hydrolyse du GTP → forme GDP (D) → protofilament courbé → dépolymérisation rapide = catastrophe ; ré-ajout de GTP-tubuline = rescue.

Instabilité dynamique : dimère GTP (forme T) s'ajoute à l'extrémité + → coiffe GTP stable → hydrolyse du GTP → forme GDP (D) → protofilament courbé → dépolymérisation rapide = catastrophe ; ré-ajout de GTP-tubuline = rescue.

Instabilité dynamique : dimère GTP (forme T) s'ajoute à l'extrémité + → coiffe GTP stable → hydrolyse du GTP → forme GDP (D) → protofilament courbé → dépolymérisation rapide = catastrophe ; ré-ajout de GTP-tubuline = rescue.

Instabilité dynamique : dimère GTP (forme T) s'ajoute à l'extrémité + → coiffe GTP stable → hydrolyse du GTP → forme GDP (D) → protofilament courbé → dépolymérisation rapide = catastrophe ; ré-ajout de GTP-tubuline = rescue.

Cc(T) < Cc(D) : la forme T polymérise plus facilement.

Catastrophe : croissance → raccourcissement. Rescue : raccourcissement → croissance. Treadmilling : polymérisation à une extrémité + dépolymérisation à l'autre (longueur stationnaire).

Stabilise (se lie le long du filament).

Dépolymérisent les microtubules (se lient aux sous-unités).

Empêche la formation du fuseau mitotique.

2 centrioles + matériel péricentriolaire (tubuline-γ). Nucléation par le γ-TuRC = étape limitante de la croissance.

MAP2 : dendrites. Tau : axone ; son agrégation = maladie d'Alzheimer.

Stathmine : séquestre les dimères. Katanine : sectionne (ATP). Détyrosination : lie la vimentine.

Kinésine → extrémité + (ATP, pas de 8 nm). Dynéine → extrémité −. Elles coexistent sur les mêmes MT.

9 + 2 (9 doublets périphériques + 2 MT centraux) ; dynéine ciliaire.

Immotilité ciliaire → infections respiratoires, infertilité, parfois situs inversus.

Astraux (pôle → cortex), kinétochoriens (pôle → kinétochore), interpolaires (se chevauchent entre les pôles).

Kinésine-5 : organise le fuseau, sépare les MT antiparallèles. Kinésine-14 : effet opposé. Monastrol (inhibe kin-5) → fuseau monopolaire.

Phosphorylation de XMAP215 → dépolymérisation de l'extrémité + des MT kinétochoriens → force qui tire le kinétochore vers le pôle.

Assemblage des FI : monomère (hélice α centrale) → dimère surenroulé → tétramère antiparallèle → 8 protofilaments torsadés.

Assemblage des FI : monomère (hélice α centrale) → dimère surenroulé → tétramère antiparallèle → 8 protofilaments torsadés.

Assemblage des FI : monomère (hélice α centrale) → dimère surenroulé → tétramère antiparallèle → 8 protofilaments torsadés.

Types de FI : nucléaire = lamines A/B/C ; vimentine-like = vimentine, desmine, GFAP ; épithélial = kératines I/II ; axonal = NF-L/M/H.

Types de FI : nucléaire = lamines A/B/C ; vimentine-like = vimentine, desmine, GFAP ; épithélial = kératines I/II ; axonal = NF-L/M/H.

Types de FI : nucléaire = lamines A/B/C ; vimentine-like = vimentine, desmine, GFAP ; épithélial = kératines I/II ; axonal = NF-L/M/H.

Types de FI : nucléaire = lamines A/B/C ; vimentine-like = vimentine, desmine, GFAP ; épithélial = kératines I/II ; axonal = NF-L/M/H.

Résistent aux déformations mécaniques ; reliés aux desmosomes/hémidesmosomes. Mutation des kératines → épidermolyse bulleuse (rupture des cellules basales de la peau).

G = monomère (42 kDa, lie l'ATP). F = polymère polarisé. 6 gènes d'actine (α muscle ; β/γ autres cellules).

Stabilise l'actine F ; marquage classique en fluorescence.

Inhibe locomotion, phagocytose, cytodiérèse (pas la contraction musculaire).

Profiline : échange ADP→ATP, favorise la polymérisation à l'extrémité +. Thymosine : séquestre les monomères (compétition avec la profiline).

Nucléation + élongation ; reste attachée à l'extrémité +.

Nucléation avec branchement à 70° → réseau dendritique (lamellipodes).

Cofiline : dépolymérise les filaments. Gelsoline : sectionne les filaments.

Structures d'actine : fibres de stress = α-actinine ; cortex cellulaire = filamine ; lamellipodes = Arp2/3 ; microvillosités = fimbrine, villine.

Structures d'actine : fibres de stress = α-actinine ; cortex cellulaire = filamine ; lamellipodes = Arp2/3 ; microvillosités = fimbrine, villine.

Structures d'actine : fibres de stress = α-actinine ; cortex cellulaire = filamine ; lamellipodes = Arp2/3 ; microvillosités = fimbrine, villine.

Structures d'actine : fibres de stress = α-actinine ; cortex cellulaire = filamine ; lamellipodes = Arp2/3 ; microvillosités = fimbrine, villine.

Filament épais (myosine II) + filament fin (actine + tropomyosine + troponine) en sarcomère : les têtes de myosine glissent vers l'extrémité + de l'actine → raccourcissement.

Active formine + profiline (assemblage d'actine) et la myosine (contraction) → anneau contractile.

Jonction d'adhérence : cadhérines + β-caténine + actine. Contact focal : intégrines + taline/vinculine + actine.

Migration cellulaire en 3 étapes : Fixation (intégrines) → Protrusion (lamellipode riche en actine, Arp2/3) → Traction (myosine II tire l'arrière).

Migration cellulaire en 3 étapes : Fixation (intégrines) → Protrusion (lamellipode riche en actine, Arp2/3) → Traction (myosine II tire l'arrière).

Migration cellulaire en 3 étapes : Fixation (intégrines) → Protrusion (lamellipode riche en actine, Arp2/3) → Traction (myosine II tire l'arrière).

Fibres de stress et contraction (via ROCK) ; à l'arrière.

Réseau branché via Arp2/3 (lamellipode) ; à l'avant.

Formation de filopodes ; initiation des protrusions.

Chromatine = ADN + histones + protéines non-histone. Chromosome = ADN + protéines portant l'information génétique.

Hétérochromatine : dense, inactive, répliquée en dernier. Euchromatine : moins dense, transcriptible.

Compaction : ADN (~2 nm) → nucléosomes (11 nm, collier de perles) → fibre de 30 nm → boucles → chromosome mitotique.

Compaction : ADN (~2 nm) → nucléosomes (11 nm, collier de perles) → fibre de 30 nm → boucles → chromosome mitotique.

Compaction : ADN (~2 nm) → nucléosomes (11 nm, collier de perles) → fibre de 30 nm → boucles → chromosome mitotique.

Octamère d'histones (2× H2A, H2B, H3, H4) + 147 pb d'ADN enroulé ; avec l'ADN de liaison ~200 pb au total.

Digestion à la nucléase de microcoque.

Queues accessibles à l'extérieur du nucléosome : cibles des modifications (code des histones). H1 (hors cœur) : compactage, trajectoire de sortie de l'ADN.

HAT ajoute un acétyle sur lysine → charge + diminuée → ADN moins serré. HDAC le retire → recompaction.

Méthylation (Lys/Arg), phosphorylation (Ser), ubiquitylation. Variant : CENP-A (centromère).

Cytosine → 5-méthylcytidine par une DNMT. Zones méthylées = moins accessibles. DNMT1 = maintien héréditaire du profil lors de la réplication (copie le patron parental).

Constitutive : centromères, télomères (toujours inactifs). Facultative : inactivation du chromosome X.

Lampbrush : ovocyte d'amphibien, boucles transcrites. Polytène : glandes salivaires de Drosophile, réplications sans division, « puffs » = régions transcrites. Montrent que condensation ↔ transcription.

L'épigénétique (code des histones, variants d'histones, méthylation de l'ADN).

Nucléosome avec CENP-A (remplace H3) → kinétochore → attachement aux microtubules (ségrégation en mitose).

Répétition TTAGGG, extrémité 3' en boucle de protection (t-loop), protégée par le télosome (shelterin).

Cycle chromosomique : G1 (chromosome simple) → S (réplication) → G2 (2 chromatides sœurs) → M (fuseau, séparation) → G1.

Cycle chromosomique : G1 (chromosome simple) → S (réplication) → G2 (2 chromatides sœurs) → M (fuseau, séparation) → G1.

G : Hoechst/Giemsa, régions A-T. R : olivomycine, régions G-C. ~2000 bandes G visibles en prométaphase.

Double membrane séparée par l'espace périnucléaire (continu avec le RE). Lamina (lamines A/B/C, filaments intermédiaires) sous la membrane interne.

3000-4000/noyau, ~30 nucléoporines. < 5000 Da : diffusion ; au-delà : transport actif.

Dans les pores nucléaires les protéines sont comprimées (pas dépliées), contrairement à l'import dans les organites.

NLS : adresse vers le noyau. NES : adresse hors du noyau.

Les karyophérines (importines/exportines).

Petite GTPase (GDP inactif ↔ GTP actif), régulée par une GEF (échange GDP→GTP) et une GAP (stimule l'hydrolyse du GTP). Schéma général des petites protéines G à savoir par cœur.

Cycle de Ran : dans le noyau, Ran-GEF → Ran-GTP se lie à l'importine chargée → libère la cargaison → Ran-GTP exporté → cytosol : Ran-GAP → Ran-GDP → recyclage.

Cycle de Ran : dans le noyau, Ran-GEF → Ran-GTP se lie à l'importine chargée → libère la cargaison → Ran-GTP exporté → cytosol : Ran-GAP → Ran-GDP → recyclage.

Cycle de Ran : dans le noyau, Ran-GEF → Ran-GTP se lie à l'importine chargée → libère la cargaison → Ran-GTP exporté → cytosol : Ran-GAP → Ran-GDP → recyclage.

NF-AT (NLS + NES) dans les lymphocytes T.

Chiffres du noyau : ~200 pb/nucléosome ; 8 histones ; fibre de 30 nm ; télomères = TTAGGG ; 3000-4000 pores ; diffusion passive < 5000 Da.

Chiffres du noyau : ~200 pb/nucléosome ; 8 histones ; fibre de 30 nm ; télomères = TTAGGG ; 3000-4000 pores ; diffusion passive < 5000 Da.

Chiffres du noyau : ~200 pb/nucléosome ; 8 histones ; fibre de 30 nm ; télomères = TTAGGG ; 3000-4000 pores ; diffusion passive < 5000 Da.

Chiffres du noyau : ~200 pb/nucléosome ; 8 histones ; fibre de 30 nm ; télomères = TTAGGG ; 3000-4000 pores ; diffusion passive < 5000 Da.

Chiffres du noyau : ~200 pb/nucléosome ; 8 histones ; fibre de 30 nm ; télomères = TTAGGG ; 3000-4000 pores ; diffusion passive < 5000 Da.

Chiffres du noyau : ~200 pb/nucléosome ; 8 histones ; fibre de 30 nm ; télomères = TTAGGG ; 3000-4000 pores ; diffusion passive < 5000 Da.

Les 4 étapes d'analyse d'un document : 1) identifier la problématique ; 2) comprendre la méthode expérimentale ; 3) décrire les données ; 4) interpréter.

Les 4 étapes d'analyse d'un document : 1) identifier la problématique ; 2) comprendre la méthode expérimentale ; 3) décrire les données ; 4) interpréter.

Les 4 étapes d'analyse d'un document : 1) identifier la problématique ; 2) comprendre la méthode expérimentale ; 3) décrire les données ; 4) interpréter.

Les 4 étapes d'analyse d'un document : 1) identifier la problématique ; 2) comprendre la méthode expérimentale ; 3) décrire les données ; 4) interpréter.

Contrôles d'abord, puis comparaisons 2 à 2, vocabulaire précis. Jamais « ça augmente » mais « la variable étudiée augmente en fonction de… », avec valeurs lues sur le graphe.

Technique : valide la méthode/le protocole (ex. témoin de charge, protéinase K qui digère tout après solubilisation). Expérimental : fait partie du design biologique, sert de référence.

Positif : résultat attendu connu, confirme que la méthode marche. Négatif : résultat négatif attendu, vérifie l'absence d'erreur/contamination et donne le niveau basal.

Une conclusion ne doit jamais être plus précise que ce que l'expérience a réellement testé. Les pistes plus fines vont dans « pour aller plus loin ».

Chaque condition expérimentale au contrôle (ex. KD vs contrôle, drogue vs contrôle), pas KD vs drogue entre eux.

ARN double brin court → complexe RISC → dégradation séquence-spécifique de l'ARNm → perte partielle et transitoire de la protéine.

Knockdown (siRNA) : perte partielle et transitoire de la protéine. Knockout : inactivation génétique permanente du gène.

siRNA non ciblant (« scrambled »), qui ne cible aucun ARNm réel. C'est un témoin négatif/expérimental (pas un contrôle positif) : il contrôle les effets non spécifiques de la transfection.

Deux approches indépendantes (génétique + chimique) qui convergent : écarte les effets hors-cible de chacune et renforce la conclusion causale.

Inhibiteur pharmacologique des formines (ex. mDia2).

Formines : filaments linéaires/parallèles, filopodes. Arp2/3 : réseau branché à 70°, lamellipodes.

Test d'OCR : oligomycine → chute = respiration liée à l'ATP ; FCCP → respiration maximale ; roténone + antimycine → respiration non-mitochondriale résiduelle.

Test d'OCR : oligomycine → chute = respiration liée à l'ATP ; FCCP → respiration maximale ; roténone + antimycine → respiration non-mitochondriale résiduelle.

Test d'OCR : oligomycine → chute = respiration liée à l'ATP ; FCCP → respiration maximale ; roténone + antimycine → respiration non-mitochondriale résiduelle.

Une capacité respiratoire de réserve (max − basal). Si FCCP n'augmente presque pas l'OCR, la chaîne est limitante.

Défaut mitochondrial, pas du complexe V, qui limite le flux d'électrons maximal : quelque part entre les complexes I et IV. On ne peut pas désigner un complexe précis avec ce seul test.

Tests complémentaires : activités enzymatiques par complexe, ou substrats/inhibiteurs spécifiques (roténone seule vs antimycine seule, substrats de II ou IV).

La PK digère les protéines accessibles. Une protéine reste intacte tant qu'une membrane intacte la protège de la PK.

TOM20 (face externe de la membrane externe). Protégés : Smac/Diablo (espace intermembranaire), Hsp60 (matrice).

Rompt la membrane externe : expose le contenu de l'espace intermembranaire à la PK. La matrice reste protégée (membrane interne intacte).

Contrôle technique : solubilise tout ; la PK digère tout, ce qui prouve qu'elle est active et que la protection observée ailleurs est physique.

Espace intermembranaire (même comportement que Smac/Diablo).

Non : il localise le compartiment seulement. L'extraction au carbonate de sodium (pH 11) tranche : protéines libres/périphériques extraites, protéines intégrales restent dans la membrane.

Pas de protéine détectée (absente ou digérée), dans l'échantillon testé.

Non (résolution insuffisante). Il faut la microscopie électronique ou une approche biochimique (ex. protection à la PK).

GFP seule : diffuse (témoin). GFP-NLS : nucléaire (NLS suffisante). Protéine ΔNLS : diffuse (NLS nécessaire).

Les karyophérines sont saturées : le transport est actif, saturable, récepteur-dépendant, pas une diffusion passive.

Mutant de Ran sans activité GTPase, piégé sous forme GTP : bloque le cycle Ran, donc le transport. Sert à tester la dépendance au cycle Ran-GTP/GDP.