실험생물학 중간고사

47 flashcardsby Dante
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1
원인체
마우스의 검사항목으로 Coronaviridae과의 Betacoronavirus속에 속함.
5개의 Prototype Strain이 있음.
Enterotropic Strain은 최초의 정관에 감염되어 polytropic strain은 최초에 호흡기에 감염 후 전신감염
임상증세
마우스 연령, strain따라 다르게 나타남
장친화성 바이러스에 감염 후 2주 이하 마우스 식욕부진, 설사, 탈수 (종종 폐사)
polytropic strain
전파
전염성 높고, polymorphic strain은 호흡기, enterotropic strain은 구강 통해 감염
수직감염은 관찰되지 않으며 biological material이 주요 감염
모성면역과 감염에 의해 동일한 strain ~ 예방 불가
마우스 strain에 따라 virus infection sensitivity 차이 존재
실험에 미치는 영향
전염성이 강하고 감염 시 어린 마우스가 폐사하는 질병이므로 즉시 실험을 중단하고 격리 후 안락사 조치 취할 것
Mouse Hepatitis Virus (MHV)
2
원인체
마우스의 검사 항목으로 2003년에 최초 보고되었고 35개 이상의 strain이 있음
macrophage, dedritic cell에 친화성이 있어 복제됨
임상증상
면역이 정상인 마우슨느 무증상 감염
129, CH3 마우스에 실험 감염되면 약한 설사가 관찰됨
interferon ~ receptor 또는 STAT1이 결핍된 마우스에 감염되면 전진성 질환으로 높은 폐사율이 나타남
임상증상으로 체중 감소, 거친 털, 등을 구부리는 자세 관찰됨
전파
분변을 통해 배출된 바이러스를 구강으로 섭취하여 감염
지속적으로 감염되며 적어도 35~60일 동안 분변을 통해 바이러스 배출
macrophage, dendritic cell에 친화성이 있고, 장, 장림프조직, 간, 비장에서 바이러스가 관찰됨
실험에 미치는 영향
감염된 일반 마우스는 영향이 없지만, 선천면역 관련 유전자가 결손된 마우스는 면역 및 장질환에 영향 없음
Mouse Norovirus (MNV)
3
원인체
마우스의 검사항목이며, 그람 양성의 간균
임상증상
일반 마우스는 임상증상이 관찰되지 않음
면역결핍마우스에서 피부의 과각화증과 탈모가 관찰됨
전파
직접접촉, 분변을 구강으로 섭취, aerosol로 전염
실험에 미치는 영향
면역결핍마우스에서 탈모와 피부염을 일으키기 때문에 실험을 중단하고 안락사 조치
일반 마우스는 실험을 진행해도 영향이 없음
Corynebacterium Bovis
4
원인체: 마우스의 검사항목이며 나선형의 그람 음성이 간균
임상 증상
일반 마우스는 임상증상이 관찰되지 않음
면역억제된 마우스에서 직장탈과 설사가 관찰되고 Inflammatory Bowel Disease와 결장암 유발
A/J 마우스에서 만성 진행성 간염과 대장염이 관찰됨
전파: 분변을 구강으로 섭취하여 전염
실험에 미치는 영향: 감염된 일반 마우스는 실험을 진행해도 영향이 없지만, A/J마우스와 면역 억제된 마우스는 간염과 대장염을 일으키므로 실험을 중단하고 안락사 조치
Helicobacter Hepaticus
5
원인체: 3가지의 원인이 있음
임상증상: 일반적으로 임상증상이 없으나 심한 감염의 경우 때때로 직장탈, 장염, 장중첩증, 변비 등의 증상이 관찰됨
전파: 충란을 통해 전파되며 분변 중의 충란을 섭취함으로써 감염됨
실험에 미치는 영향:
감염된 마우스와 랫드는 실험을 진행해도 영향이 거의 없음
위생상 좋지 못하며 한번 동물사에 감염되면 제거하기 어려움
구제법: 기생충제를 투여하면 제거할 수도 있지만 환경에 존재하는 충란에 의해 재차 감염되므로 실험 후 동물을 모두 안락사하고 철저히 소독, 청소 등 관리가 필요
Pinworm
6
원인체
마우스, 랫드의 검사항목으로 세포벽이 없는 그람 음성세균임상증상
Murine Respiratory Mycoplasmosis(MRM)의 원인체로 마우스, 랫드에서 만성호흡기질환을 유발
일반적으로 마우스는 무증상감염
화농성 비염, 중이염, 만성폐렴으로 발전했을 때 임상증상이 나타나는데 chattering sound와 호흡곤란이 가장 특징적인 임상증상
원인은 비염과 화농성 삼출물
활동저하, 헝클어진 털, 체중감소 등도 관찰되며 중이염이 있으면 머리를 한쪽으로 숙임
드물지만 뇌와 척수에 화농성 염증이 수반되면 이완성 마비가 관찰됨.
어린 랫드는 임상증상이 관찰되지 않으면 나이든 랫드는 폐와 수포음, 호흡곤란, snuffling, chattering sound, 콧물, 눈물, 눈물 닦기, 머리를 한쪽으로 숙이는 등의 임상증상이 관찰됨-중이에 심한 병변이 있을 때 꼬리를 잡으면 한쪽 방향으로 계속해서 회전전파-과거에 많이 발생했지만 배리어 시설이 보급되면서 거의 발생하지 않음
전염성이 매우 높으며 직접접촉과 aerosol을 통해 전염-랫드에서 수직 감염도 보고됨실험에 미치는 영향-전염성이 높고 감염되면 임상 증상(호흡기 이상, 생식기 이상, 비정상적인 면역학전 반응 등)을 나타내므로 즉시 실험을 중단하고 격리 후 안락사 조치
Mycoplasma Pulmonis
7
원인체
마우스, 랫드의 검사항목으로 십이지장에 주로 존재
편모를 가지고 있음
임상증상
일반 마우스와 랫드는 임상증상이 나타나지 않지만 면역억제마우스와 랫드는 심한 경우 폐사전파
분변을 통해 전파되며 분변을 섭취함으로써 감염실험에 미치는 영향감염된 대부분의 일반마우스와 랫드는 실험을 진행해도 영향이 없지만 면역 억제된 마우스와 랫드는 임상증상이 나타나므로 병변판정에 주의
병원성 장내 원충
8
원인체: 마우스, 랫드의 검사항목으로 대장에 주로 존재
임상증상: 마우스와 랫드는 임상증상이 거의 나타나지 않음
전파: 분변을 통해 전파되며 분변을 섭취함으로써 감염
실험에 미치는 영향: 감염된 마우스와 랫드는 실험을 진행해도 영향이 거의 없음.
비병원성 장내 원충
9
원인체
기회감염균으로 마우스, 랫드의 검사항목이며 비운동성의 그람양성균
임상증상
면역부전마우스에서 화농성 결막염, 안구 주위 농양, 화농성 피부염, 포피샘 농양, 화농성 귀두포피염 등이 나타남
질병의 경과를 보면 얼굴, 귀, 목, 어깨, 앞발 등에 습진성 피부염이 발생하며 이후 궤양성 피부염, 농염, 봉와직염으로 진행되어 화농성 피부염으로 발전
전파
접촉감염과 aerosol로 전염
실험에 미치는 영향
감염된 대부분의 일반 마우스와 랫드는 실험을 진행해도 영향이 없지만 면역억제마우스와 랫드는 임상증상이 나타나므로 병변 판정에 주의
Staphylococcus aureus
10
원인체
마우스, 랫드의 검사항목이며 비운동성의 그람 음성의 단간균
임상증상
단독감염 시 임상증상이 거의 관찰되지 않음
복합감염 시 화농성 병변을 일으킴
역억제된 동물에서 눈, 결막, 피부, 유선 등의 화농성 병변 또는 삼출성 병변을 일으킴
전파
주로 직접 접촉에 의해 전염
실험에 미치는 영향
감염된 대부분의 일반 마우스는 실험을 진행해도 영향이 없지만 면역억제마우스는 임상증상이 나타나므로 병변 판정에 주의
Pasteurella Pneumotropica
11
원인체
기회감염균이며 마우스, 랫드의 검사항목으로 운동성이 있는 그람 음성 간균
임상증상
자연감염 시 임상증상이 거의 없음
nude와 SCID마우스는 폐사되기도 함
감염되면 만성적으로 코인두, 입인두, 소화기계에 존재
전파
오염된 환경이나 감염된 동물의 직접접촉으로 전염
실험에 미치는 영향
감염된 대부분의 일반 마우스는 실험을 진행해도 영향이 없지만 면역억제마우스는 임상증상이 나타나므로 병변 판정에 주의
Pseudomonas Aerusinosa
12
동물실험의 정의
동물을 이용해 실험하고, 이 실험에 의해 동물에게 나타나는 반응을 관찰하고, 반응을 통해 실시한 실험적 처치가 동물/사람에게 가져올 효과 예측.
13
윤리적, 과학적, 안전한 동물실험 위해
1. 공시동물에 관한 통제
2. 실험환경의 통제
3. 동물실험방법의 통제
14
Good Laboratory Practice
GLP
15
GLP 이유
Sulfanilamide - 동물실험 안함
Mer - 29 : 데이터 조작
Thalidomide : 결과해석오류
16
GLP 목적
동물실험 관리 강화 및 신뢰성 높이기.
17
GLP 수단
재구성성 , 재현성, 일관성
Reconstructibility, Reproducibility, Consistency
18
동물실험 카테고리 A
위해 없는 단순관찰
19
동물실험 카테고리 B
채혈 주사 순간보정. 약간의 위해
20
동물실험 카테고리 C
척추동물에서 마취하의 혈관 노출. 단기간 음수 사료공급 제한 등
21
동물실험 카테고리 D
척추동물서 고통 격감시키는 약제나 보조수단과 함께 수술. 심리적 억압 등 스트레스.
22
동물실험 카테고리 E
극심한 고통. 고통격감수단 없음.
23
동물실험 일반원칙
3R원칙. 국제규범
Replacement
Refinement
Reduction
24
대체실험방법.
생물시스템(무척추동물, 미생물, 식물 등. 세포배양 조직배양 등)
무생물 시스템 : 기계모델, 화학반응
컴퓨터 시뮬레이션 : 안정성 평가, 교육에 활용.
Replacement
25
동물 고통 최소화.
실험 방법 간소화, 정교화. 수단, 시설 잘 갖추기.
파일럿실험, 임상병리 활용, 문헌조사 비교분석, 통증 완화 약물 사용
비약리학적 기술 이용. 환경풍부화 프로그램 활용.
인도적 종료시점 수립. humane endpoint
Refinement
26
합리적 크기 실험군. 동물 최대한 활용, 정확한 통계학적 분석.
Reduction
27
중증도 - 심한정도.
문지름 햘큄 자가상해, 흔들기, 먹기싫어함, 움직임 없음
머리, 눈, 입, 귀
28
외측접근 - 중증도
흉골측 - 극심한 고통.
움직이기 싫어함, 호흡변화, 침울
흉부
29
미약, 중증도
비정상적 자세, 식욕저하, 자기방어
복부
30
중증-심함.
문지름, 물기, 비정상적 장 움직임, 배설
직장부위
31
중증도 - 심함.
대퇴골, 상완골 특히 심함.
움직이기 싫어함. 비정상적 자세. 움직임. 자기보효. 햝기, 자해
뼈
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중증도 - 심함,
머리와 몸 자세 비정상. 걸음걸이 비정상, 움직이기 싫어함.
경추
33
인도적 종료시점 (6가지)
1. 종양 10프로 이상 성장.
2. 식욕부진 수척 - 20프로 이상 감량
3. 보행불능 = 횡와자세 증가
4. 심각한 기관/전신 증상 : 가쁜 호흡, 기침, 수포음 / 쇼크, 출혈, 과민증 / 위장에서 심한 설사, 구토 / 말초신경 에서 근육약화, 경련성 마비 / 중추신경계 : 회전, 맹목, 치매, 경련
5. 저체온증 : 4-6도 감소
6. 죽음임박상황
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안락사 허용 불가능 (7가지)
1. chloral hydrate
2. chloroform
3. cyanide
4. 개두감압술
5. 근신경계 차단
6. 다양한 약리학적 물리적 방법들
7. 드라이아이스 발생하는 CO2
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mouse 사용이유 (3가지)
1. 쉽게 사육 / 번식.
2. 작교 경제적.
3. 유전학적으로 지구상에서 가장 잘 밝혀짐.
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미생물학적 분류
Germ free animal = isolator
Gnotobiotes = isolator
SPF animals = barrier system
Conventional
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유전적 분류
근교계 inbred strain - 극도 근친교배. 형매/친자교배 20세대 이상
변이종 mutant strain - 유전자 기호 가지고 특정 계통 표현 가능한 동물. 유전자원으로서 유용한 특성 가진다. 선발 및 도태에 의해 특정 유전형질유지
폐쇄군 closed colony - 근교계 유래해서 일정 집단 내에서만 번식 게속.
교잡종 hybrid 품종/계통간 잡종. 실험동물로 근교계간 교접에 의한 F1 활용 높다.
잡종 mongrel : 유전적 컨트롤리
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면역부전 마우스, 면역부전 랫드, 유전자변형마우스 (GEM), Patient-derived Xenograft (PDX)
높은 배리어 (High Barrier)
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미생물 모니터링 특성
반입시 검사, 정기 검사 (연구 & 생산 기관)
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유전 모니터링 특징
- 일반 동물 (생산기관)
- 형질전환동물 (연구 & 생간 기관)
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Virus 종류 6종
1. Ectromelia Virus (Mouse Pox)
2. Lymphocytic choriomeningitis Virus (LCMV)
3. Mouse Hepatitis Virus (MHV)
4. Rat Coronavirus (SDAV)
5. Sendai Virus
6. Hantavirus
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Bacteria 종류 7종
1. Mycoplasma Pulmonis
2. Pasteurella Pneumotropica
3. Pseudomonas Aeruginosa
4. Salmonella
5. Streptococcus Pneumonirae
6. Citrobacter Rodentium
7. Clostridium Piliforme (Tyzzer's Disease)
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Parasite 종류 (3종)
1. Eotoparasites
2. Intestinal Protozoa
3. Pinworm
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Virus Screening 방법
1차: ELISA
2차: IFA (가끔 PCR)

Lactate dehydrogenase-elevating Virus에 한하여 효소상승여부/PCR로 확인
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세균 Screening 방법
ELISA, IFA, PCR, 배양법 모두 사용
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기생충 Screening 방법
관찰
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곰팡이 Screening 방법
피부: 배양법
Pneumocytis spp. ELISA or IFA > PCR
Encephalitozoon cuniculi ELISA > IFA
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